Neuroprotekcinės 4-aminopiridino savybės

Kontaktai: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 El. paštas:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP ir Philipp Albrecht, MD

Abstraktus

Kaip nuo įtampos priklausomų kalio (Kv) kanalų antagonistas, 4-aminopiridinas (4-AP) naudojamas kaip simptominė kelių neurologinių sutrikimų terapija. IS sergančių pacientų regėjimo funkcijos ir motorinių įgūdžių pagerėjimas bei nuovargio mažinimas buvo priskirtas 4-AP. Jo pailginto atpalaidavimo formulė (fampridinas) patvirtinta simptominiam vaikščiojimo negalios gydymui sergant IS. Teigiamas poveikis buvo paaiškintas aksoninių Kv kanalų blokavimu, taip pagerinant laidumą išilgai demielinizuotų aksonų. Tačiau vis daugiau įrodymų rodo, kad 4-AP gali turėti papildomų savybių, išskyrus simptominį veikimo būdą. Šioje apžvalgoje apibendriname ikiklinikinius ir klinikinius duomenis apie galimas neuroprotekcines 4-AP savybes.

4-Aminopiridinas sergant neurologinėmis ligomis

Aminopiridinai yra piridino monoamino ir diamino darinių grupė, kuri slopina nuo įtampos priklausomus kalio (Kv) kanalus. Ypač 2 plataus spektro kalio kanalų blokatoriai 4-aminopiridinas (4-AP) ir 3,4-aminopiridinas (3,4- DAP) buvo naudojami kaip naujos tiriamosios medžiagos. sergant įvairiomis neurologinėmis ligomis. Nors 3,4-DAP yra stipresnis kalio kanalų antagonistas, 4-AP lengviau prasiskverbia per hematoencefalinį barjerą1 ir buvo kliniškai pranašesnis pacientams, sergantiems IS, ypač gerinant regėjimo funkciją,2 nuovargį. ,3 pažinimas,4 ir ėjimo greitis.1 Be to, pranešta, kad 4-AP palengvina nervinį laidumą sergant neurologinėmis ligomis, išskyrus MS.5,6

Cistanche poveikis: apsaugokite neuronus

Sveikuose aksonuose kanalai Kv1.1 ir Kv1.2 yra susitelkę šalia Ranvier mazgų.7 Šie kanalai atsiskleidžia po demielinizacijos ir migruoja per demielinizuotą segmentą. Tuo pačiu metu šių kanalų raiška padidėja kelis kartus.8 Šis neteisingas Kv kanalų perskirstymas pablogina veikimo potencialų perdavimą, todėl atsiranda nuolatinė negalia. 4-AP blokuoja šiuos atvirus kalio kanalus ir todėl sustiprina signalo perdavimą.9,10Kv1.3 kanalas buvo aptiktas žmogaus T ląstelėse,11 buvo labai išreikštas uždegiminiuose infiltratuose MS smegenyse12 ir yra išreikštas makrofaguose, mikroglijose ir efektorinėse atminties T ląstelėse.13 Selektyvūs ir neselektyvūs Kv1.3 kanalų blokatoriai gali suteikti imunomoduliuojančių savybių, slopindami ląstelių proliferaciją ir priešuždegiminį citokinų sekreciją.14 Iki 2009 m. atlikti tyrimai nepadėjo nustatyti 4-AP kaip simptominis IS gydymas, nes vaistų koncentracija pacientų kraujyje buvo nenuspėjama, o per didelės dozės buvo susijusios su epilepsijos priepuolių ir sąmonės sutrikimo rizika.15–18 Todėl buvo sukurtas fampridinas, pailginto atpalaidavimo 4-AP formulė ir vėliau buvo patvirtintas simptominiam vaikščiojimo negalios gydymui sergant MS.19–23 Įdomu tai, kad pastaruoju metu vis daugiau įrodymų rodo, kad be šių Jei buvo pripažintas simptominis poveikis, 4-AP gali turėti papildomų apsauginių savybių.

4-AP įvertinimas naudojant in vitro modelius

In vitro daugelyje modelių buvo pastebėtas neuroprotekcinis 4-AP poveikis. Kai motoriniai neuronai (MN) diferencijuojasi nuo sukeltų pluripotentinių kamieninių ląstelių pacientams, sergantiems amiotrofine šonine skleroze, turinčių FUS ir SOD1 geno mutacijas, buvo paveikti 4-AP, jonų kanalų disbalansas buvo pašalintas, neuronų aktyvumo lygis padidėjo, endoplazminis tinklas. sumažėjo stresas ir susilpnėjo kaspazės aktyvacija. Mutantinės MN parodė mažesnes natrio sroves ir Na plus / K plius santykius, kurie bent iš dalies gali būti jų padidėjusio jaudrumo priežastis. Tai buvo priešinga po 4-AP gydymo, dėl kurio sumažėjo kalio srovės ir atkuriami spontaniniai aktyvumo modeliai bei sinapsinis įėjimas į MN.24 4-Gydant AP sumažėjo priešuždegiminių mediatorių išsiskyrimas iš žmogaus mikroglijų, paveiktų amiloido Beta ir apsaugoti kultivuoti žiurkės hipokampo neuronai, maudomi amiloidu beta apdorotų mikroglijų supernatantuose.25 Pranešama, kad 4-AP darinys sumažino -sinukleino kaupimąsi, oksidaciją, uždegimą ir Rho kinazės aktyvaciją Parkinsono ligos modelyje in vitro.26 Kiti tyrimai in vitro pranešė, kad 4-AP padidino cAMP atsako elementą surišančio baltymo fosforilinimą, apsaugotą nuo ląstelių streso glutamatu, NMDA ir 3-nitropropiono rūgštimi, veikiančia žiurkių naujagimių smegenėlių granulių neuronus. Glutamatas sumažina gyvybingumą ir ląstelėse, iš anksto kondicionuotose 4-AP, bet reikšmingai nesuaktyvinus kaspazės-3. Šie stebėjimai rodo, kad 4-AP pirmiausia yra veiksmingas nuo nekrozinio eksitotoksiškumo.27 Taip pat buvo įrodyta, kad jis apsaugo pirmines neuronų kultūras nuo deguonies ir gliukozės trūkumo arba ouabaino/DL-trijų{21}}benziloksiasparto rūgšties toksiškumo.28

Cistanche neuroapsauginis poveikis

Ikiklinikiniai 4-AP tyrimai in vivo

Keli tyrimai ištyrė apsauginį 4-AP poveikį įvairiems ligų modeliams (1 lentelė). Periferinių nervų pažeidimo modeliuose profilaktinis ir ankstyvas 4-AP gydymas paskatino atkurti nervo laidumo greitį, paskatino remielinizaciją ir padidino aksonų sritį. Pastarieji stebėjimai buvo paaiškinti poveikiu, panašiu į tuos, kurie atsiranda po elektrinės stimuliacijos, pavyzdžiui, neuronų smegenų kilmės neurotrofinio faktoriaus (BDNF) lygio padidėjimu.29 Alzheimerio ligos modelyje amiloido beta injekcija į Sprague Dawley hipokampą. žiurkės sukėlė neuronų pažeidimą ir padidino mikroglijos aktyvaciją. Nustatyta, kad kasdien vartojant 1 mg/kg 4-AP, slopinama mikroglijos aktyvacija ir užtikrinama neuroprotekcija. Tai buvo siejama su 4-AP gebėjimu blokuoti neinaktyvuojančią išoriškai rektifikuojančią K plius srovę aktyvuotose mikroglijose ir sumažinti priešuždegiminių citokinų gamybą ląstelėse.25 Tyrimai, naudojant kainato sukelto hipokampo neurotoksiškumo in vivo modelį, atskleidė stiprų neuroprotekcinį { {11}}AP, kurį galėtų panaikinti nekonkurencinis NMDA receptorių antagonistas MK-801 ir adenozino A1 antagonistas 8-ciklopentilo teofilinas. Šie stebėjimai rodo, kad NMDA receptoriai yra svarbūs šiame modelyje 4-AP tarpininkaujamai apsaugai.30 Lewis žiurkių autoimuninės neuropatijos gyvūnų modelyje 4-AP pagerino klinikinį sunkumą ir patologinius elektrofiziologinius radinius. Autoriai teigė, kad aksonų apsauga buvo užtikrinta blokuojant natrio sukeltas vidines sroves ankstyvoje fazėje, nes didelis membranos potencialas ūminėje uždegimo fazėje gali būti neurotoksiškas. Lėtinėje fazėje nervų laidumas galėjo pagerėti blokuojant kalio sukeltą išorinę srovę.1

Eksperimentinio autoimuninio encefalomielito (EAE), imuninės sistemos sukelto CNS uždegimo modelio, atkartojančio pagrindines IS ypatybes, atveju buvo pranešta, kad Kv kanalų blokada slopina T ląstelių aktyvaciją, galbūt blokuodama Kv1.3 pošeimos kanalus ir susilpnindama aksonų demielinizaciją. ir degeneracija, veikiant K.3.1 kanalą ant astroglijos, potencialiai sukeldama BDNF signalą. molva. SJL pelių proteolipidų baltymų sukeltas EAE gydymas 4-AP žymiai pagerino skaitmeninius balus, kurie buvo patvirtinti patologiškai. Pastebėta, kad 4-AP gydytų pelių glijos fibrilinio baltymo ekspresija sumažėjo, o T-ląstelių aktyvacija ir Th1/17 poliarizacija buvo sumažinta. Tačiau lėtinio mielino oligodendrocitų glikoproteino (MOG) peptido sukelto EAE modelio C57BL/6 pelėms 4-AP nepakeitė EAE eigos.5 Kitu tyrimu taip pat buvo tiriamas {{19} } AP MOG-EAE modelyje C57BL/6 pelėms ir pranešta apie simptominį, bet ne ligą keičiantį poveikį. Nei profilaktinis, nei terapinis 4-AP gydymas nesumažino skaitmeninės EAE eigos sunkumo, o 4-AP gydytiems gyvūnams pagerėjo judrumas, įvertinus pėdsakų ir rotaro analizę. Nugaros smegenų demielinizacija, neuronų pažeidimai ir smegenų tūrio pokyčių MRT vaizdas nepakito. CD4* T-ląstelių proliferacija, IL17 arba IFN-y gamyba taip pat nebuvo paveikta.3

Visai neseniai įrodėme, kad, be simptominio poveikio nervų laidumui stiprinti, 4-AP gali užkirsti kelią tinklainės neurodegeneracijai MOG peptidų sukelto eksperimentinio optinio neurito (EAEON) metu C5BL6 pelėms. UŠT) vaizdų, regos funkcijų tyrimų ir histologinio įvertinimo metu pastebėjome, kad EAEON modeliuose sumažėjo vidinių tinklainės sluoksnių degeneracijos mastas, tiek profilaktiškai, tiek terapiniam 4-AP skyrimui. Šiame modelyje 4-AP sustiprino imunomoduliuojančio gydymo sfingozino-1- fosfato receptorių moduliatoriumi fingolimodu poveikį, o tai rodo nepriklausomus veikimo būdus. Galima pagrįstai manyti, kad šis poveikis neapsiriboja vien fingolimodu ir taikomas 4-AP kartu su kitais IS imunomoduliuojančiais vaistais. Mūsų tyrimo metu regos nervo histologija atskleidė, kad priešingai nei fingolimodas, 4-AP neturėjo reikšmingos įtakos mikroglijų aktyvacijai ir (arba) limfocitų ar makrofagų infiltracijai, o tai rodo, kad apsauginis poveikis nebuvo susijęs su priešuždegiminiu režimu. veiksmų. Atsižvelgiant į tai, 4-AP gydymas netrukdė EAE indukcijai, patvirtintas T ląstelių restimuliacijos tyrimu. Be to, stebėjome reikšmingą apsaugą nuo tinklainės neurodegeneracijos gydant 4-AP, taip pat neuždegiminiame regos nervo traiškymo modelyje, o fingolimodas neturėjo jokio poveikio. Įdomu tai, kad in vitro gydymas 4-AP nesugebėjo tiesiogiai apsaugoti tinklainės ganglijų ląstelių. Vietoj to, histologiniai ir in vitro eksperimentai parodė, kad 4-AP tarpininkauja mielino ir oligodendrocitų pirmtakų ląstelių stabilizavimas. Šis poveikis buvo susijęs su padidėjusiu kalcio antplūdžiu ir aktyvuotų T ląstelių (NFAT) branduolinio faktoriaus perkėlimu į branduolį. Anksčiau buvo įrodyta, kad 4-AP reguliuoja kalcio homeostazę, padidindamas inozitolio trifosfato kiekį ir taip skatindamas kalcio išsiskyrimą iš intracelulinių kalcio atsargų. Tačiau papildomi 4-AP tyrimai demielinizuojančių modelių, pavyzdžiui, gydymo kupizonu arba transgeninių pelių modeliai su indukuojama oligodendrocitų abliacija, gali būti naudingi patvirtinant šias sąlygas. Esamuose demielinizacijos modelių su gyvūnais tyrimais daugiausia dėmesio skiriama 4-AP gebėjimui atkurti veikimo potencialą, tačiau trūksta tolesnių oligodendroglijų ląstelių tyrimų (pav.).

Svarbu paminėti, kad dozės, reikalingos tokiam poveikiui in vitro pasiekti, yra maždaug 100-1,000x didesnės nei koncentracija, pasiekiama pacientams. Todėl stebėjimams in vivo ir in vitro gali būti svarbūs papildomi ar kiti mechanizmai. Tai apima, bet tuo neapsiribojant, sumažėjusį demielinizuotų aksonų energijos išsklaijimą dėl kalio nutekėjimo blokavimo ir stipresnių apsauginių bei atkuriamų smegenų pajėgumų, netiesiogiai atsirandančių dėl padidėjusio mobilumo ir didesnio fizinio krūvio.

Be to, negalima atmesti 4-AP imunomoduliacinių mechanizmų, ypač dėl to, kad PLP sukeltos EAE SJL pelėse buvo įrodyta sumažėjusi T-ląstelių aktyvacija ir Th1/17 poliarizacija.3 Be to, ikiklinikiniai kitų ligų modelių tyrimai buvo nustatyti. susilpnėjęs priešuždegiminių mediatorių aktyvavimas ir sumažintas mikroglijų išsiskyrimas. Šie prieštaringi rezultatai išryškina skirtingus įvairių gyvūnų modelių patologinius mechanizmus, kai imuninės ląstelės yra daugiau ar mažiau jautrios gydymo strategijoms. Mūsų rezultatų ir ankstesnių pranešimų apie tik simptominį poveikį MOG peptido sukeltai EAE C57BL6 pelėms" galima bent iš dalies paaiškinti (1) dozavimo skirtumais, nes kiti vartojo 100 ug ir 600 ug/pelei per dieną dozes, kadangi mes skyrėme 250 ug/pelei per dieną;(2) gydymo trukmė (atitinkamai 40, 60 ir 90 dienų, Göbel ir kt.* Moriguchi ir kt.3 ir Dietrich ir kt.); ir (3) MOG kiekis, naudojamas imunizacijai, nes mes sunaudojome 200 ug MOG vienai pelei, o kiti naudojo tik 100 ug MOG vienai pelei. Naujausi tyrimai skirti žarnyno mikrobiotos vaidmeniui, turinčiam įtakos EAE indukcijai ir sunkumui, keičiant efektorių ir reguliuojančių T ir B ląstelių pusiausvyrą. Graužikų mikrobioma įvairiose gyvūnų patalpose gali skirtis, todėl gali skirtis EAE sunkumas, eiga ir galbūt net atsakas į gydymą. Kartu šie veiksniai gali lemti tyrimo rezultatų nevienalytiškumą.

Cistanche neuroapsauginis poveikis

Klinikinis požiūris į 4-AP pacientams, sergantiems IS

Keli klinikiniai tyrimai nuo devintojo dešimtmečio jau parodė teigiamą 4-AP poveikį žmonėms, sergantiems IS. Be kita ko, jie nustatė motorinių40-2 ir regėjimo funkcijų-44 pagerėjimą ir nuovargį.5-7 Tačiau tyrimo apribojimai, vienodo tyrimo plano nebuvimas ir mažas pacientų skaičius neleido patvirtinti {{ 3 jie nustatė, kad pradinio greito atpalaidavimo junginio koncentracija plazmoje yra nenuosekli ir nenuspėjama. Pirmąjį klinikinį tyrimą su SR-4-AP 1997 m. atliko Schwid ir kt.49, kuris parodė reikšmingą ėjimo greičio pagerėjimą ir raumenų jėgos didėjimo tendenciją.

Pailginto atpalaidavimo technologijos sistemą sukūrė Elan Pharmaceuticals. Jame buvo naudojama vadinamoji matricinė vaistų absorbcijos sistema, sudaryta iš patentuotos polimerinės matricos, kuri kontroliuoja išsiskyrimą difuzijos ir virškinimo trakto fermentų erozijos būdu. Dėl to sumažėjo didžiausias vaistų kiekis plazmoje ir pailgėjo veikimo trukmė.1 Iš pradžių SR-4-AP buvo išbandytas 4 bandymuose. 2007 m. Goodman ir kt.1 36 pacientams, sergantiems išsėtine skleroze, didino dozę po 5 mg du kartus per parą nuo 10 iki 40 mg. Atliekant 25 pėdų ėjimo testą (T25FW) reikšmingų pokyčių nepastebėta, o post hoc analizė, konvertuojanti duomenis į ėjimo greitį (ft/s), pasiekė reikšmingumo. Be to, buvo pastebėtas nuovargio, apie kurį pranešama apie save, pagerėjimas. 2008 m. dozių palyginimo tyrime (atsitiktinių imčių, dvigubai aklas, placebu kontroliuojamas) Goodman ir kt. 2 įdarbino 206 pacientus, vartojusius placebą arba 10, 15 arba 20 mg dozes du kartus per dieną. Vėlgi, post hoc analizė, kurioje lyginamas ėjimo greičio pagerėjimas, nustatė žymiai geresnius rezultatus visose gydymo grupėse atskirai ir visų SR-4-AP gydytų pacientų grupėje, palyginti su placebu. Mūzos stiprumas pagerėjo 10-mg ir 15-mg vartojusių grupių, bet ne 20 mg vartojusių grupių, palyginti su placebą vartojusiais asmenimis. Dviejų vėlesnių fazės Ⅲ klinikinių tyrimų metu (21-savaitės dvigubai aklas, placebu kontroliuojamas atsitiktinių imčių tyrimas, kuriame dalyvavo 301 pacientas ir 14-savaitės dvigubai aklas placebu kontroliuojamas tyrimas, 239 pacientai) su 10 mg du kartus per parą, pacientai buvo suskirstyti į reaguojančių ir nereaguojančių grupes, apibrėžtas nuosekliai pagerėjus T25FW. Abiejuose tyrimuose ėjimo greičio padidėjimas buvo reikšmingas, palyginti su nereaguojančiųjų arba placebo grupe. Be to, pagerėjo respondentų 12-Item MS Walking Scale (MSWS{45}}) balas.2122

Atliekant atvirą išplėstinį šių tyrimų tyrimą, buvo įrodyta, kad klinikinis pagerėjimas buvo prarastas nutraukus vaistą, bet vėl atsinaujino praėjus 2 savaitėms po gydymo SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, tabletės SR{ {3}}2010 m. sausio mėn. AP gavo visišką Maisto ir vaistų administracijos patvirtinimą, kad pagerintų IS sergančių pacientų vaikščiojimą, tačiau 2011 m. Europos vaistų agentūra (EMA) gavo tik sąlyginį rinkodaros leidimą. Remiantis minėtais bandymais, patvirtinimas buvo su sąlyga, kad būtų pateikti daugiau ilgalaikio veiksmingumo ir saugumo duomenų. Todėl buvo pradėtas II fazės tiriamasis (MOBILE) ir I fazės patvirtinamasis tyrimas (ENHANCE).

Tiriamajame MOBLE tyrime, kuriame dalyvavo 132 dalyviai, buvo nustatyta, kad pagerėjo paciento visuotinis pokyčių įspūdis (PGIC), MSWS-12 ir laikas iki ir eikite (TUG)23, siekiant įvertinti ilgalaikį veiksmingumą ir saugumą. Buvo atliktas patvirtinantis ENHANCE tyrimas SR-4-AP (10 mg du kartus per parą, kuriame dalyvavo 646 IS pacientai). Be patobulinimų, apie kuriuos pranešta MOBILE tyrime, autoriai nustatė reikšmingą SR-4-AP gydytų pacientų pagerėjimą pagal 29-Item MS Impact Scale.5 Po to EMA suteikė besąlyginį SR{ patvirtinimą. {11}}AP, skirtas pacientams, sergantiems IS, turintiems vaikščiojimo negalią, gydyti. ENABLE fazės stebėjimo tyrimas, kuriame dalyvavo 901 pacientas, parodė, kad gydymas SR-4-AP yra naudingas pacientams, sergantiems IS, nes jie suvokia fizinį funkcionavimą ir psichologinę sveikatą realiame pasaulyje2 (2 lentelė).

Remdamasi pirmiau aprašytais daug žadančiais ikiklinikiniais duomenimis apie apsaugą nuo tinklainės neurodegeneracijos, mūsų grupė atliko retrospektyvų, daugiacentrį UŠT tyrimą, siekdama išilgai palyginti tinklainės neurodegeneraciją tarp 52 pacientų, kuriems buvo taikomas nuolatinis 4-AP gydymas, ir 51 kontrolinės grupės, kuri atitiko visas svarbias kovariacijas. naudojant iš anksto nustatytą atitikimo algoritmą. Remiantis eksperimentiniais duomenimis, tuo pačiu metu gydant 4-AP, geltonosios dėmės tinklainės nervinių skaidulų sluoksnio degeneracija sumažėjo per 2 metus. Tačiau šias išvadas reikia patvirtinti nepriklausomais ir idealiai perspektyviais kohortos tyrimais, ypač dėl to, kad poveikio dydis buvo mažas, o peripapilinio tinklainės nervinių skaidulų sluoksnio ir geltonosios dėmės gangliono ląstelių / vidinio plexiforminio sluoksnio retėjimo dažnis grupėse reikšmingai nesiskyrė. . Šie apsauginio 4AP poveikio skirtumai tik mRNFL, bet nei pRNFL, nei McGill nėra lengvai paaiškinami. Svarbu paminėti, kad kadangi 4AP yra licencijuotas tik siekiant pagerinti vaikščiojimo negalią pacientams, sergantiems EDSS 3.5-5, analizuoti pokyčių rodikliai buvo tiriami vėlesnėse ligos stadijose ir be ūminio optinio neurito. Esant tokiai aplinkai, atsiranda tik labai subtilūs tinklainės pokyčiai, todėl norint nustatyti gydymo poveikį, reikės didelių grupių. Todėl retrospektyvus tyrimas su pacientais tikrai nebuvo pakankamai galingas, kad būtų galima patikimai nustatyti apsauginį gydymo poveikį, ir nenuostabu, kad tik vienas iš rezultatų buvo teigiamas. Galbūt mRNFL buvo jautriausias sluoksnis gydymo poveikiui nustatyti.5"

Apibendrinant galima teigti, kad vis daugiau in vivo įrodymų rodo, kad 4-AP, be gerai žinomo simptominio poveikio, užkertant kelią neurodegeneracijai, gali pakeisti EAEON ligos eigą ir galbūt net pacientus, sergančius IS. Preliminarūs in vitro įrodymai rodo, kad dalyvauja ląstelių kalcio kiekis ir NFAT kelias, tačiau reikalingi tolesni tyrimai, siekiant išsiaiškinti tikslius molekulinius mechanizmus, pagrindžiančius 4-AP neuroprotekcinį poveikį imuninės sistemos sukeltai uždegiminei demielinizacijai. Šios išvados gali turėti didelį poveikį IS gydymo strategijoms, jei bus patvirtintos perspektyviame atsitiktinių imčių kontroliuojamo klinikinio tyrimo metu.

Cistanche poveikis

Nuorodos

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Aksonų funkcijos atkūrimas 4-aminopiridinu: klinikinis veiksmingumas sergant išsėtine skleroze ir ne tik. CNS vaistai 2018;32:637–651.

2. Horton L, Conger A, Conger D ir kt. 4-Aminopiridino poveikis regėjimui išsėtine skleroze sergančių pacientų, sergančių optine neuropatija. Neurologija 2013;80:1862–1866.

3. Morrow SA, Rosehart H, Johnson AM. Fampridino-SR poveikis kognityviniam nuovargiui atsitiktinių imčių dvigubai aklo kryžminio tyrimo metu pacientams, sergantiems IS. Mult Scler Relat Disord 2017;11:4–9.

4. Brolis SD, Filli L, Geissler O ir kt. Teigiamas fampridino poveikis pažinimui, nuovargiui ir depresijai pacientams, sergantiems išsėtine skleroze virš 2 metų. J Neurol 2018; 265:1016–1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ ir kt. Ikiklinikinis 4-aminopiridino tyrimas pacientams, sergantiems lėtiniu nugaros smegenų pažeidimu. Paraplegija 1993;31:216–224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z ir kt. Dalfampridinas pagerina sensomotorinę funkciją žiurkėms, turinčioms lėtinį deficitą po vidurinės smegenų arterijos okliuzijos. Insultas 2013;44: 1942–1950.

7. Žoliapjovės JS, Rhodes KJ. Įtampa valdomų jonų kanalų lokalizavimas žinduolių smegenyse. Annu Rev Physiol 2004;66:477–519.

8. Rodr´ ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ ıguez JE. Keturių naujų 4-aminopiridino K(plius) kanalų blokatorių struktūros ir aktyvumo ryšio tyrimai. Sci Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. 4-Aminopiridino ir tetraetilamonio jonų poveikis normalioms ir demielinizuotoms žinduolių nervų skaiduloms. J. Physiol, 1981; 313:301–315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J ir kt. Fampridino poveikis aksonų jaudrumui sergant išsėtine skleroze. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Įtampa valdomi K plius kanalai žmogaus T limfocituose: vaidmuo mitogenezėje? Gamta 1984;307:465–468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L ir kt. Nuo įtampos priklausomas kalio kanalas Kv1.3 yra labai išreikštas uždegiminiuose infiltratuose išsėtinės sklerozės smegenyse. Proc Natl Acad Sci USA 2005; 102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J ir kt. Kv1.3 kanalas kaip pagrindinis terapinis neurouždegiminių ligų taikinys: naujausia technika ir ne tik. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R ir kt. Įtampa valdomas Kv1.3 K(plius) kanalas efektorinės atminties T ląstelėse kaip naujas MS taikinys. J Clin Invest 2003;111:1703–1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-aminopiridino toksiškumas netyčia perdozavus keturiems pacientams, sergantiems išsėtine skleroze. Neurologija 2008;71: 1833–1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Neįprastas 4-aminopiridino toksiškumo atvejis. J Emerg Med 2006;30:175–177.

17. Schwam E. Sunkus atsitiktinis 4-aminopiridino perdozavimas dėl sudėtingos vaistinės klaidos. J Emerg Med 2011;41:51–54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A ir kt. Fampridino poveikis priepuolių rizikai pacientams, sergantiems išsėtine skleroze. „Mult Scler Relat Disord“, 2020 m.; 43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A ir kt. Fampridinas-SR sergant išsėtine skleroze: atsitiktinių imčių, dvigubai aklas, placebu kontroliuojamas, dozės diapazono tyrimas. Mult Scler 2007; 13:357–368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA ir kt. Ilgalaikio atpalaidavimo fampridino dozių palyginimas sergant išsėtine skleroze. Neurology 2008;71:1134–1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB ir kt. Ilgalaikio atpalaidavimo geriamasis fampridinas sergant išsėtine skleroze: atsitiktinių imčių, dvigubai aklas, kontroliuojamas tyrimas. Lancet 2009;373: 732–738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR ir kt. 3 fazės pailginto atpalaidavimo geriamojo dalfampridino tyrimas sergant išsėtine skleroze. Ann Neurol 2010;68:494–502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C ir kt. Pailginto atpalaidavimo fampridinas ir vaikščiojimas bei pusiausvyra sergant IS: atsitiktinių imčių kontroliuojamas MOBILE tyrimas. Mult Scler 2016;22:212–221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Buflfler S ir kt. 4-Aminopiridino sukelta veikla išgelbėja hipojautrius motorinius neuronus iš amiotrofinės šoninės sklerozės pacientų, sukeltų pluripotentinių kamieninių ląstelių. Stem Cells 2016;34:1563–1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Plataus spektro 4-aminopiridino poveikis moduliuojant amiloido beta1-42- sukeltą ląstelių signalizaciją ir funkcinius atsakus žmogaus mikroglijoje. J Neurosci 2006;26:11652–11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z ir kt. Kelių 4-aminopiridino darinių, kaip galimų neuroprotekcinių agentų, skirtų Parkinsono ligai gydyti, projektavimas, sintezė, imunocitocheminis įvertinimas ir molekulinio prijungimo tyrimas. Bioorg Chem 2017;73:63–75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. Išankstinis kondicionavimas 4-aminopiridinu apsaugo smegenėlių granulių neuronus nuo eksitotoksiškumo. Brain Res 2009; 1294: 165–175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Išankstinio kondicionavimo sukeltos neuroprotekcijos nesėkmė ir gelbėjimas sunkių insulto tipo įžeidimų metu. Neurophar mycology 2016;105:533–542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A ir kt. 4-Aminopiridinas skatina funkcinį atsigavimą ir remielinizaciją ūminio periferinio nervo pažeidimo atveju. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. In vivo gydymas K plius kanalų blokatoriumi 4-aminopiridinu apsaugo nuo kainato sukeltos neuronų ląstelių mirties, nes suaktyvina pelių NMDA receptorius hipokampas. Neurofarmakologija 2005;48:810–821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-Aminopiridinas pagerina eksperimentinį autoimuninį neuritą Lewis žiurkėms. J Neuroimmunol 2017;305:72–74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB ir kt. Naujos įtampos priklausomo kalio kanalo Kv1.3 inhibitorių, pasižyminčių imunosupresinėmis savybėmis, identifikavimas. Biochemija 2002;41:7781–7794.

33. Varga Z, bendrovė T, Papp F ir kt. Kalio kanalų ekspresija žmogaus CD4 ir reguliuojamosiose bei natūraliose T ląstelėse iš sveikų asmenų ir pacientų, sergančių išsėtine skleroze. Immunol Let 2009; 124:95–101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. Uždegiminės demielinizacijos ir aksonų degeneracijos slopinimas slopinant Kv3 kanalus. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Aminopiridinas pagerina recidyvuojantį-remituojantį eksperimentinį autoimuninį encefalomielitą SJL/J pelėse. J Neuroimmunol 2018;323:131–135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM ir kt. 4-Aminopiridinas pagerina judrumą, bet ne ligos eigą išsėtinės sklerozės gyvūnų modelyje. Exp Neurol 2013; 248: 62–71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C ir kt. Apsauginis 4-aminopiridino poveikis eksperimentiniam optiniam neuritui ir išsėtinei sklerozei. Smegenys 2020; 143: 1127–1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. Kalcio mobilizavimas iš intraląstelinių atsargų, neurotransmiterių sukeltų kalcio pereinamųjų procesų stiprinimas ir talpinis kalcio patekimas į 4-aminopiridiną. J Neurosci 2001;21:3135–3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopiridinas pacientams, sergantiems išsėtine skleroze: dozė ir serumo lygis, susiję su veiksmingumu ir saugumu. Clin Neuropharmacol 1993;16:195–204.

40. Davis FA, Stefoski D, Rush J. Per burną vartojamas 4-aminopiridinas pagerina klinikinius išsėtinės sklerozės požymius. Ann Neurol 1990;27:186–192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-Aminopiridinas pagerina klinikinius išsėtinės sklerozės požymius. Ann Neurol 1987;21:71–77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopiridinas sergant išsėtine skleroze: ilgalaikis vartojimas. Neurology 1991;41: 1344–1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. 4-Aminopiridino poveikis pacientams, sergantiems išsėtine skleroze. J Neurol Sci 1983;60:353-362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM ir kt. 4-Aminopiridino poveikis klinikiniams išsėtinės sklerozės požymiams: atsitiktinių imčių, placebu kontroliuojamas, dvigubai aklas, kryžminis tyrimas. Ann Neurol 1992;32:123–130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopiridinas gydant išsėtine skleroze sergančius pacientus. Ilgalaikis efektyvumas ir saugumas. Arch Neurol 1994;51:292–296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Nuovargis sergant išsėtine skleroze: daugiamatis įvertinimas ir atsakas į simptominį gydymą. Mult Scler 2004;10:462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C ir kt. Nuovargis sergant progresuojančia išsėtine skleroze: atsitiktinių imčių, dvigubai aklo, placebu kontroliuojamo kryžminio geriamojo 4-aminopiridino tyrimo rezultatai. Mult Scler 2001;7:354–358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopiridinas: naujas gyvenimas senam vaistui. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. Kiekybinis ilgalaikio atpalaidavimo 4-aminopiridino, skirto simptominiam išsėtinės sklerozės gydymui, įvertinimas. Neurology 1997;48:817–821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR ir kt. Ilgalaikis dalfampridino saugumas ir veiksmingumas sergant išsėtine skleroze sergančių pacientų vaikščiojimo sutrikimu: dviejų 3 fazės klinikinių tyrimų atviro pratęsimo rezultatai. Mult Scler 2015;21:1322–1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P ir kt. Kliniškai reikšmingo išsėtine skleroze sergančių dalyvių savarankiško vaikščiojimo pagerėjimo įvertinimas: atsitiktinių imčių, dvigubai aklo, pailginto atpalaidavimo fampridino III fazės ENHANCE tyrimo rezultatai. CNS vaistai 2019;33:61–79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lapland DA ir kt. Pagerėjęs pacientų praneštas išsėtinės sklerozės poveikis sveikatai: PR-fampridino tyrimas ENABLE. Mult Scler 2016;22: 944–954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Aminopiridinas kaip viena priemonė, skirta diagnozuoti ir gydyti sunkius nervų sumušimo pažeidimus. Mil Med 2019; 184 (priedas 1): 379–385.