Špinatų metanolinis ekstraktas susilpnina diabetu sergančių žiurkių tinklainės degeneraciją 2 dalis

Prašau susisiektioscar.xiao@wecistanche.comDaugiau informacijos

3. Rezultatai

3.1. Špinatų (MVĮ) metanolinis ekstraktas slopina galvijų serumo albumino (BSA) glikaciją in vitro

Nustatytas antiglikacinis poveikis esant skirtingoms SME koncentracijoms BSA. Šis poveikis buvo įvertintas slopinant AGE ir fruktozamino susidarymą mišiniuose: BSA redukuojantys cukrūs (gliukozė arba fruktozė) ir BSA-metilglioksalis (BSA-MGO) po keturių savaičių inkubacijos. 1 lentelėje pateikti AGE susidarymo rezultatai, įvertinti fluorescencija.cistanche varpos augimasBSA redukuojančiuose cukruose ir BSA-MGO mišiniuose, inkubuotuose su SME esant 200 mg/ml (SME-200), AGE lygis sumažėjo, palyginti su teigiama kontrole (BSA-gliukozės, BSA-fruktozės ir BSA- MGO) (p<0.05). concentrations="" below="" 20mg/ml="" did="" not="" show="" significant="" differences="" compared="" to="" positive="" controls.="" the="" inhibition="" of="" ages="" formation="" by="" aminoguanidine(ag)="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" was="" higher="" than="" sme-200=""><0.05) and,="" therefore,="" than="" the="" positive="" controls=""><0.01). both="" sme-200="" and="" ag="" decreased="" fructosamine="" concentrations="" compared="" with="" controls=""><0.05).sme-200 compared="" to="" agin="" incubation="" with="" bsa-mgo="" further="" reduced="" the="" level="" of="" fructosamine=""><0.05)(table>

3.1.2. MVĮ poveikis karbonilo ir sumažinto tiolio grupių lygiams

Siekiant nustatyti, ar SVV slopina BSA oksidaciją, susijusią su karbonilo grupių susidarymu ir tiolio grupių išeikvojimu jo glikacijos metu, buvo atlikti in vitro tyrimai. 1 lentelėje parodytas karbonilo grupių lygis inkubacijos sąlygomis, naudojant BSA redukuojančių cukrų ir BSA-MGO mišinius. Šiuose mišiniuose buvo atvirkštinis ryšys tarp MVĮ koncentracijos ir karbonilo grupių lygio. Visų pirma, MVĮ-200 sukėlė reikšmingą sumažėjimą, palyginti su teigiama kontrole (p<0.05). as="" expected,="" ag="" significantly="" inhibited="" the="" formation="" of="" carbonyl="" groups="" in="" the="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" (p=""><0.01), demonstrating="" its="" inhibitory="" effect="" on="" protein="" carbonylation,="" as="" reported="" [39].="" between="" sme="" and="" ag,="" there="" was="" no="" difference="" in="" carbonylation="">

Norėdami sužinoti daugiau, spustelėkite čia

Tiolio grupės lygis BSA buvo nustatytas glikacijos tyrimo metu. MVĮ koncentracija parodė tendenciją išsaugoti tiolio grupes visuose mišiniuose. MVĮ{0}} nustatytas reikšmingas tiolio grupių lygio padidėjimas BSA redukuojančiuose cukruose (p.<0.05) and="" the="" bsa-mgo=""><0.01) compared="" to="" positive="" controls.="" ag="" induced="" the="" highest="" conservation="" of="" thiol="" groups="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and=""><0.05). however,="" in="" the="" incubation="" of="" sme-200="" with="" bsa-mgo,="" thiol="" group="" levels="" are="" higher="" compared="" to="" ag="" (p=""><0.05) (table="">

Ankstesniame tyrime tirtos 5, 10 ir 25 mg/ml MVĮ koncentracijos neparodė reikšmingo AGE slopinimo, fruktozamino, karbonilo grupių susidarymo ir BSA tiolio grupių išeikvojimo lygių (duomenys nerodomi).

2 priede parodyti galimi karbonilo ir AGE junginiai, susidarę inkubuojant BSA su redukuojančiu cukrumi. Taip pat parodytos MGO arba glioksalio inkubacijos būdu pagamintos BSA redukuotos tiolio grupės (cys34) transformacijos molekulės [40-42].

3.2. MVĮ tyrimai STZ sukeltų diabetinių žiurkių (STZ) tinklainėje

3.2.1. MVĮ poveikis karboksimetil-lizino (CML) susidarymui ir jo sąveikai su AGE receptoriais (RAGE) STZ

1 paveiksle parodytas 400 mg/kg SME poveikis LML susidarymui, RAGE ekspresijai ir CML-RAGE sąveikai (CML/RAGE) STZ tinklainėje. 1A paveiksle pastebėta, kad tiek CML, tiek RAGE yra pasiskirstę ganglioninių ląstelių sluoksnyje (GCL), vidiniame ląstelių sluoksnyje (INL) ir išoriniame branduoliniame sluoksnyje (ONL), o sujungtas CML / RAGE daugiausia buvo paskirstytas INL.cistanche salsos privalumai1B-D paveiksluose parodytas integruotas optinis tankis (OD) CML, RAGE ir CML/RAGE skirtinguose tinklainės sluoksniuose (pateikiamas kaip nuo mažiausios iki didžiausios dėžutės ir ūsų diagramos). Duomenys (vidurkis ± SD) įtraukti į A priedėlį (A1 lentelė).

1 pav. Špinatų metanolinio ekstrakto (SME) poveikis karboksimetillizinui (CML), pažangių glikacijos galutinių produktų (RAGE) receptoriui, ir CML-RAGE sąveikai (CML/RAGE) streptozotocino sukeltų diabetinių žiurkių tinklainėje. STZ). (A) LML, RAGE ir CML / RAGE dažų pasiskirstymas parodytas normoglikeminių žiurkių (NG), STZ, apdorotų aminoguanidinu (STZ-AG) ir apdorotų SME (STZ-SME), tinklainėje. (BD) parodykite integruotą optinį tankį (IOD, luitas / pikselis²) dėžutės ir ūsų diagramoje ganglinių ląstelių sluoksnyje (GCL), vidiniame branduoliniame sluoksnyje (INL) ir išoriniame branduoliniame sluoksnyje (ONL) kiekvienam imuniniam dažymui. *p<0.01 compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to="" stz;="" and=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.n1="PR" =="" photoreceptors.="">cistanche tubulosa dosage reddit1B paveiksle parodyta, kad MVĮ sumažino LML imuninį dažymą visuose trijuose tinklainės sluoksniuose, palyginti su STZ (p<0.01). the="" treatment="" with="" ag(stz-ag)presented="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" stz-sme="" in="" cml="" staining="" in="" both="" inl="" and=""><0.05). in="" gcl,="" there="" was="" no="" difference.="" in="" ng,="" cml="" staining="" was="" lower="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" than="" in="" all="" those="" treated="" with="" stz(p≤0.05).="" figure="" 1c,="" and="" d="" show="" that="" stainings="" for="" rage="" and="" cml/rage="" were="" higher="" in="" stzthan="" stz-sme,="" stz-ag,="" and="" ng=""><>

Cistanche gali kovoti su senėjimu

Kalbant apie RAGE dažymą tarp STZ-SME ir STZ-AG, nebuvo skirtumo tarp GCL ir INL, tuo tarpu ONL buvo pastebėtas STZ-SME padidėjimas (p.<0.01).stz-sme decreased="" cml/rage="" in="" all="" three="" retinal="" layers="" compared="" to="" stz=""><0.01), whereas="" stz-agin="" gcl="" and="" onlinduced="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" sme=""><0.01). in="" inl,="" between="" stz-ag="" and="" stz-sme,="" there="" was="" no="">

3.2.2. MVĮ antioksidacinis poveikis STZ tinklainėje

SVV antioksidacinis poveikis buvo įvertintas imuniniu dažymu NADPH oksidazei -4 (Nox-4), indukuojamai azoto oksido sintazei (iNOS) ir nitrotirozinui (NT). 2A paveiksle parodytas kiekvieno imuninio dažymo pasiskirstymas trijuose tinklainės sluoksniuose (GCL, INL ir ONL). 2B-D paveiksluose parodytas kiekvieno žymeklio teigiamų ląstelių procentas, pateiktas kaip minimumas iki didžiausios dėžutės ir ūsų diagramos. Duomenys (vidurkis ± SD) yra įtraukti į A priedėlį (A2 lentelę). Dažant Nox4 (2B pav.), SME gydymas (STZ-SME) sumažino ląstelių, dažytų trijuose tinklainės sluoksniuose, procentą, palyginti su STZ (p<0.05). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" stz-sme="" showed="" a="" lower="" decrease="" for="" nox4="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" (p=""><0.05).>iNOS imuninis dažymas taip pat pasiskirstė trijuose tinklainės praustuvuose (2A pav.). 2C paveiksle STZ-SME sumažino teigiamų iNOS ląstelių procentą trijuose tinklainės sluoksniuose, palyginti su STZ (p).<0.01). comparing="" sme="" effect="" with="" ag="" in="" this="" immunostaining,="" stz-ag="" decreased="" significantly="" in="" the="" three="" retinal="" layers=""><0.01). figure="" 2dshows="" the="" percentage="" of="" the="" positive="" cells="" for="" nt="" in="" the="" different="" groups.="" sme="" decreased="" this="" value="" for="" all="" retinal="" layers="" compared="" to=""><0.01). when="" the="" percentage="" between="" sme="" and="" ag="" was="" compared,="" there="" was="" no="" difference="" in="" gcl,="" whereas,="" in="" inl="" and="" onl,="" stz-sme="" had="" a="" lower=""><0.01). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" oxidative="" markers="" than="" the="" stz="" group="" (p="" <="" 0.01).="">cistanche แอ ม เว ย์Taip pat buvo nustatytas SVV antioksidacinis poveikis diabetinėje tinklainėje pagal malondialdehido (MDA) susidarymo lygį. 3 paveiksle parodytos MDA koncentracijos tiriamose grupėse. STZ-SME ir STZ-AG MDA lygiai (5,1±0.1 ir 4,34±1.{{10}}) sumažėjo, palyginti su STZ (6,3±0,8;p<0.01). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" the="" levels="" are="" increased="" in=""><0.05).in ng(2.07±0.42),="" the="" levels="" were="" lowest="" compared="" to="" the="" stz="" groups=""><>

2 pav. SVV antioksidacinis poveikis STZ tinklainėje. (A) Reprezentatyvios NADPH oksidazės 4 (Nox-4) (A), indukuojamos azoto oksido sintazės (iNOS) ir nitrotirozino (NT) imunofluorescencijos mikrografijos. (BD) parodykite GCL, INL ir ONL teigiamų ląstelių procentinės dalies diagramas su dėžute ir ūsais kiekvienam imuniniam dažymui NG, STZ, STZ-AG ir STZ-SME grupėse. Branduoliai buvo nudažyti DAPI (mėlyna spalva).*p<0.01 compared="" to="" ng;="" α=""><0.05 compared="" to="" stz,="" and="" β=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="" in="" supplement="" 3,="" dapi="" and="" each="" specific="" antibody="" stain="" are="" shown="" in="" a="" single="" channel="" and="" the="" fused="">

3 pav. SME antioksidacinis poveikis diabetinėje tinklainėje, nustatytas lipidų peroksidacijos būdu. Buvo analizuojamas malondialdehido (MDA) lygis NG, STZ, STZ-AG ir STZ-SME grupėse. Koncentracijos parodytos dėžės ir ūsų diagramoje.*p< 0.01="" compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to=""><0.05compared to="">

3.2.3.MVĮ poveikis tinklainės STZ uždegimui

Branduolinio NF-kB p65, kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF) ir glijos fibrilinio rūgštinio baltymo (GFAP) dažymo procentas buvo įvertintas siekiant nustatyti, ar MVĮ gydymas STZ susilpnina tinklainės uždegimą.

Branduolinis NF-kB dažymas buvo trijuose tinklainės sluoksniuose (GCL, INL ir ONL) visose grupėse (4A pav.). STZ-SME NF-kB dažymo procentas buvo mažesnis, palyginti su STZ ir STZ-AG. trys tinklainės praustuvai (p<0.01)(figure 4b).="" similarly,="" diabetic="" rats="" treated="" with="" ag(stz-ag)showed="" that="" nf-staining="" is="" decreased="" in="" all="" three="" lavers="" of="" the="" retina="" compared="" to="" stz="" (p=""><0.05). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" values="" of="" the="" percentage="" of="" nf-kb="" staining="" in="" the="" three="" layers="" of="" the="" retina=""><0.01). the="" data="" (mean±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a(table="" a3).="" retinal="" vegf="" staining="" (figure="" 4a)="" and="" the="" percentage="" of="" positive="" cells="" were="" evaluated="" in="" the="" experimental="" groups="" (figure="" 4c).vegf="" staining="" was="" mainly="" localized="" to="" gcl="" (figure="" 4a).in="" stz,="" the="" percentage="" of="" vegf="" positive="" cells="" is="" increased(42.1="" ±="" 4.42)="" compared="" to=""><><0.01),and><0.01).however, there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" smes="" and="" ag.="" the="" percentage="" of="" vegf="" staining="" in="" the="" ng="" group="" was="" the="" lowest="" of="" all=""><>

4 pav. SVV įtaka tinklainės STZ uždegimui.(A) Reprezentatyvūs branduolinio NF-kB (pavaizduoti raudonomis rodyklėmis), kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF; pavaizduoti geltonomis rodyklėmis) ir glijos fibriliarinio imuninio dažymo vaizdai. rūgštinis baltymas (GFAP; raudonos ir baltos rodyklės rodo atitinkamai didžiausią ir mažiausią dažymo intensyvumą) NG, STZ, STZ-AG ir STZ-SME grupėse. (B, C) Dėžutės ir ūsų diagramos rodo atitinkamai branduolinio NF-kB (GCL, INL ir ONL) ir VEGF (GCL) teigiamo dažymo procentą. (D) parodytas GFAP dažymo išilgai tinklainės IOD.*p<0.01 compared="" to=""><0.01 compared="" to="" stz;="" andβ=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="">Tinklainės uždegimas taip pat buvo nustatytas GFAP dažymu kaip astrogliozės žymekliu (4A pav.), o jo pasiskirstymas išilgai tinklainės sluoksnių buvo kiekybiškai įvertintas IOD (4D pav.). STZ tinklainėje GFAP buvo stebimas nuo GCL iki INL (IOD=3126± 1018), o NG grupėje GFAP buvo pastebėtas daugiausia nervų skaidulų sluoksnyje (IOD=1160 ± 561;p<0.01). in="" stz-sme,="" gfap="" staining="" was="" decreased="" (iod="2192±752)" compared="" to=""><0.01)and compared="" to="" stz-ag(iod=""><0.0018). however,="" there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" stz="" and="">

3.2.4. MVĮ poveikis S100 kalcį surišančio baltymo B (S100B) lygiams STZ tinklainėje

S100B baltymas yra susijęs su tinklainės uždegimu, reguliuojamu NF-kB branduolio internalizavimu. Taigi, norint ištirti, ar SVV turi įtakos S100B ekspresijai STZ tinklainėje, buvo atliktas šio baltymo imuninis dažymas (IOD). Visose grupėse S100B dažymas buvo paskirstytas iš GCL į ONL (5A pav.). 5B paveiksle parodyta, kad NG atveju S100B dažymo IOD buvo didžiausias ONL, palyginti su gydomomis grupėmis (p<0.01), but="" was="" lower="" in="" gcl="" and=""><0.01).in sme,="" the="" iod="" of="" s100b="" staining="" was="" decreased="" in="" the="" three="" layers="" compared="" to=""><0.01 for="" all="" layers).="">kiek cistanche paimtiMVĮ S100B dažymas GCL ir INL buvo mažesnis nei AG (abi, p<0.01); however,="" in="" onl,="" there="" was="" no="" difference.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a="" (table="">

3.2.5. MVĮ poveikis tinklainės degeneracijai STZ

Apsauginis SME poveikis tinklainės GCL, INL ir ONL STZ degeneracijai buvo įvertintas naudojant terminalo deoksinukleotidiltransferazės (TdT) tarpininkaujamą deoksiuridino trifosfato (dUTP) slapyvardžio žymėjimo (TUNEL) tyrimą.

6A paveiksle pavaizduoti reprezentatyvūs tiriamų grupių (NG, STZ, STZ-AG ir STZ-SME) tinklainės apoptozės pasiskirstymo vaizdai. 6B paveiksle parodytas TUNEL dažymo GCL, INL ir ONL IOD diagrama su dėžute ir ūsais. STZ-SME ir STZ-AG apoptozė yra žymiai sumažinta visuose sluoksniuose, palyginti su STZ (p<0.01). stz-ag="" had="" a="" more="" significant="" decrease="" in="" apoptosis="" compared="" to=""><0.01).in the="" three="" retinal="" layers="" of="" ng,="" the="" tunel="" staining="" is="" lower="" than="" those="" treated="" with="" stz=""><0.01). in="" onl,="" stz-ag="" and="" ng="" did="" not="" show="" significant="" differences.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" figure="">

4. Diskusija

Šis tyrimas praneša apie teigiamą špinatų metanolio ekstrakto (SVV) poveikį diabetinių žiurkių tinklainės sluoksniuose, susijusius su jo anti-pažangiais glikacijos galutiniais produktais (AGE), antioksidacinėmis ir priešuždegiminėmis savybėmis. Nustatyta, kad MVĮ sumažina baltymų glikaciją, sumažina glikozilinto hemoglobino, fruktozamino ir aldozės reduktazės kiekį zebrafijoje, sergant sukeltu diabetu, o tai rodo antiglikacijos aktyvumą [11]. Mūsų in vitro eksperimentai, naudojant galvijų serumo albuminą (BSA), parodė, kad MVĮ sumažino AGE, fruktozamino ir karbonilo grupių susidarymą ir sumažino tiolio grupių išeikvojimą BSA, inkubuojant su redukuojančiais cukrumi arba metilglioksaliu (MGO). Šie rezultatai rodo, kad MVĮ gali slopinti baltymų glikaciją mechanizmu antioksidantu, kuris taip pat gali trukdyti MGO susidarymui. Įrodyta, kad MGO sukelia karboksimetil-lizino (LML) susidarymą ant baltymų in vitro [43]. Padidėjęs LML lygis, kuris yra diabeto komplikacijų tarpininkas [44,45].

Todėl šiame darbe buvo įvertinta, ar MVĮ gydymas apsaugo nuo LML kaupimosi streptozotocino sukeltų diabetinių žiurkių (STZ) tinklainėje, susijusiai su oksidaciniais ir priešuždegiminiais atsakais, kuriuos sukelia galimas AGE receptorių (RAGE) aktyvavimas. Rezultatai parodė, kad gydymas SME sumažino LML dažymą ganglioninių ląstelių sluoksnyje (GCL), vidiniame branduoliniame sluoksnyje (INL) ir išoriniame branduoliniame sluoksnyje (ONL). Nors MVĮ buvo didesnis LML lygis INL ir ONL nei aminoguanidinas (AG) ir be GCL skirtumo, rezultatai rodo, kad MVĮ gydymas gali slopinti šio AGE gamybą diabetinėje tinklainėje. Be to, buvo pastebėta, kad LML padidėjimas diabetinės tinklainės sluoksniuose buvo lygiagretus RAGE dažymo lygio padidėjimui.

RAGE reguliavimas ir AGE kaupimasis buvo susiję su tinklainės pažeidimu. Viena iš CML-RAGE sąveikos pasekmių yra reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) susidarymas, o tai savo ruožtu sukelia per didelę priešuždegiminių genų ekspresiją [46]. Mūsų rezultatai rodo, kad diabetinės tinklainės, gydytos MVĮ, sumažino CML ir RAGE susiliejimą (CML / RAGE), daugiausia GCL ir INL sluoksniuose, o tai rodo, kad sumažėjęs CML / RAGE gali susilpninti oksidacinio streso takų aktyvavimą. ir uždegiminės reakcijos, kurios buvo aprašytos RAGE aktyvacijai [46].

AGEs-RAGE sukeltas oksidacinis stresas yra tarpininkaujamas aktyvuojant NADPH oksidazės fermentus, kurie yra superoksido anijonų gamintojai ir kurių padaugėja diabetinėse tinklainės ląstelėse [46, 47]. NADPH oksidazės, Nox1/Nox4, prisideda prie padidėjusio ROS, uždegimo ir tinklainės neovaskuliarizacijos [48]. Be to, susidaręs superoksidas reaguoja su azoto oksidu (NO), gamindamas peroksinitritą – kitą laisvąjį radikalą, kuris dalyvauja pažeidžiant diabetinę tinklainę [49,50]. Padidėjusį NO kiekį diabetu sergančioje tinklainėje lemia padidėjęs indukuojamos azoto oksido sintazės (iNOS) aktyvumas, dėl kurio padidėja ląstelinių kapiliarų tankis, tinklainės sustorėjimas, gliozė ir padidėjęs nitratų/nitritų kiekis [51]. Čia rezultatai rodo, kad MVĮ gydymas sumažino Nox4 imuninį dažymą GCL, INL ir ONL, palyginti su STZ. Be to, palyginti su AG, MVĮ žymiai sumažino Nox4 dažymą trijuose tinklainės sluoksniuose.

Kalbant apie iNOS dažymo lygį, MVĮ grupėje sumažėjo trijų tinklainės praustuvų nei STZ. Kai iNOS dažymas AG buvo lyginamas su STZ, rezultatai parodė reikšmingesnį GCL, INL ir ONL sluoksnių sumažėjimą nei SME, o tai rodo, kad AG yra stiprus iNOS inhibitorius, kaip buvo pranešta sergant diabetine retinopatija (DR). 29].

Kalbant apie imuninį dažymą 3-nitrotirozinui, SME sumažino šį žymenį visuose trijuose sluoksniuose, palyginti su STZ. Kita vertus, lipidų peroksidacija ir AGE susidarymas DR yra glaudžiai susiję [13]. LML taip pat susidaro oksiduojantis polinesočiąsias riebalų rūgštis (PUFA)[52], kurių gausu tinklainėje. Dėl PUFA oksidacijos reakcijų susidaro reaktyvios karbonilo rūšys, tokios kaip malondialdehidas (MDA), kurios vėliau reaguoja su baltymų cisteino, histidino ir lizino likučiais, sudarydamos palyginti stabilius aduktus [53]. Mūsų rezultatai rodo, kad LML dažymas pliuso sluoksniuosediabeto tinklainė sumažėjo gydant MVĮ, o tai atitinka sumažėjusią lipidų peroksidaciją.

AGE-RAGE sąveika diabetinėje tinklainėje yra būklė, kuri padidina uždegiminių veiksnių, kurie savo ruožtu dalyvauja tinklainės degeneracijoje, gamybą. Dėl šios sąveikos suaktyvėja branduolinis NF-kB, kuris sukelia per didelę priešuždegiminių veiksnių, tokių kaip iNOS ir kraujagyslių endotelio augimo faktorius (VEGF)54, ekspresiją. VEGF yra stiprus mitogeninis aktyvatorius ir centrinis angiogenezės organizatorius DR. Nox4 taip pat reguliuoja VEGF ekspresiją oksidacinio streso ir hiperglikemijos sąlygomis [55]. Taigi, AGE-RAGE sąveikos blokavimas gali būti svarbus silpninant VEGF ekspresiją DR patogenezėje.

Kita vertus, glijos fibrilinis rūgštinis baltymas (GFAP) yra tinklainės glijos ląstelėse (ganglioninėse ląstelėse), astrocituose, Miulerio ląstelėse ir mikroglijose esantis baltymas, o jo padidėjimas rodo nervinės gliozės susidarymą tinklainėje [56]. Todėl NF-kB branduolinis perkėlimas ir per didelė VEGF bei GFAP ekspresija yra priešuždegiminiai veiksniai, susiję su DR patogeneze [13]. Šie veiksniai savo ruožtu susidaro dėl AGE formavimosi ir AGE-RAGE sąveikos [4557,58]. Čia buvo įrodyta, kad MVĮ gydymas sumažino CML-RAGE susiliejimą diabetinės tinklainės sluoksniuose, be branduolinio NF-KB, VEGF ir gliozės sumažėjimo. Šie rezultatai rodo, kad MVĮ gali susilpninti uždegiminį atsaką, slopindamos CML-RAGE sąveiką.

Uždegiminis atsakas taip pat buvo įvertintas dažant S100 kalcį jungiantį baltymą B (S100B). S100B yra baltymas, didinantis oksidacinį stresą ir stimuliuojantis uždegiminį atsaką bei neurodegeneraciją DR [58,59]. Rezultatai rodo, kad S100B dažymas buvo paskirstytas trijuose tinklainės sluoksniuose STZ. Buvo pranešta, kad INL yra Müller glialinių ląstelių [58], kurios gali būti susijusios su jautrumu gliozei. S100B dažymas INL sumažėjo gydant MVĮ, palyginti su STZ ir AG, o tai rodo, kad MVĮ šiame sluoksnyje slopina uždegiminį atsaką. .

Normoglikemijos žiurkėms S100B lygis ONL buvo didesnis nei STZ grupėse. Gali būti, kad normoglikemijos žiurkėms S100B lygis gali dalyvauti reguliuojant su membrana susietą guanilato ciklaze pagrįstą signalizacijos kelią fotoreceptoriuose [60]. Sergančiųjų cukriniu diabetu grupėse sumažėjęs S100B lygis gali sukelti fototransdukcijos praradimą fotoreceptorių ląstelėje, kuri naudoja cGMP kaip antrąjį pasiuntinį, kad susietų šviesos sugertį su katijonų kanalų laidumo pokyčiais plazmos membranoje [61. Taigi MVĮ dėl savo antioksidacinių savybių gali sumažinti S100B baltymų kiekį [62]. Tačiau norint apibūdinti S100B funkciją ir sąveiką skirtinguose tinklainės sluoksniuose, reikia atlikti tolesnius tyrimus.Sergant cukriniu diabetu (DM), ląstelių mirtis buvo pastebėta kelių tipų tinklainės ląstelėse, tokiose kaip ganglijos ląstelės, glijos ląstelės (Miulerio ląstelės ir astrocitai) ir mikroglijos [63]. AGEs / RAGE gali sukelti tinklainės neuronų ląstelių apoptozę, kurią sukelia padidėjęs oksidacinis stresas arba priešuždegiminių citokinų aktyvacija |64]. Šio tyrimo rezultatai įrodo, kad GCL, INL ir ONL apoptozę susilpnino MVĮ.

5. Išvados

Šis tyrimas parodė, kad MVĮ vartojimas pagerino diabeto sukeltą patologinį profilį streptozotocino sukeltų diabetinių žiurkių (STZ) tinklainės sluoksniuose. In vitro tyrime MVĮ parodė antioksidacinį aktyvumą, nes slopino tarpinius Maillardo reakcijos produktus (fruktozaminą ir dikarbonilą). junginiai), užkertant kelią AGE susidarymui ir redukuotų tiolio grupių išeikvojimui BSA. Diabeto tinklainėje gydymas MVĮ susilpnino LML susidarymą, CML-RAGE sąveiką ir suaktyvino priešuždegiminius atsakus (VEGF, GFAP, S100B ir RAGE). Be to, MVĮ sukėlė sumažėjusius oksidacinio streso žymenis (iNOS, Nox4 ir NT) ir apoptozę. Galiausiai, rezultatai rodo, kad MVĮ turi apsauginį poveikį STZ tinklainės degeneracijai.

Šis straipsnis ištrauktas iš Antioxidants 2021, 10, 717. https://doi.org/10.3390/antiox10050717 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants