Spontaninė granulocitinė leukemija sergant NOD/Shi-scid IL-2R null Pelė

Santrauka:Čia pranešame apie spontaninės granulocitinės leukemijos atvejį 51-savaičių senumo vyriškiui NOD/Shi-SCIDIL-2R null (NOG) pelė. Pelė parodėprogresuojanti anemijairšiurkštus kvėpavimo judesys. Makroskopiškai blužnis pakitusi spalva ir padidėjo. Histologiškai kaulų čiulpaikrūtinkaulisir šlaunikaulis buvo labai ląstelinis ir beveik vien užpildytasneoplastinės ląstelės. Neoplastinių ląstelių branduoliai buvo dideli, ovalūs arba šiek tiek netaisyklingos formos, o nedaugelis ląstelių turėjoinkstas- arba žiedo formos branduoliai.Neoplastinės ląstelėsplačiai įsiskverbė į organus, o blužnis ir kepenys buvo akivaizdžiai susiję. Imunohistochemiškai didelė neoplastinių ląstelių populiacija raudonojoje blužnies pulpoje ir kepenų sinusoidėje buvo teigiamamieloperoksidazė. Remiantis histologiniais požymiais, šis atvejis buvo diagnozuotasgranulocitinė leukemija. Ši nauja informacija apiespontaniški navikaigali būti naudinga tinkamai naudojant šią pelės padermę tolesniuose tyrimuose. (DOI: 10.1293/tox.{2}}; J Toxicol Pathol 2021; 34: 241–244)

Raktiniai žodžiai: granulocitinė leukemija, NOG pelė, spontaniškas navikas

SPUSTELĖKITE ČIA, KAD GAUTI NATŪRALIŲ EKOLOGIŠKŲ CISTANČIŲ EKSTRAKTĄ, SU 25% ECHINAKOZIDU IR 9% AKTEOZIDU, TURINČIŲ INKSTU FUNKCIJĄ

„Wecistanche“ – didžiausio cistansų eksportuotojo Kinijoje – pagalbinė tarnyba:

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp / Tel:+86 15292862950

Įsigykite daugiau specifikacijų:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-parduotuvė

Spontaninė granulocitinė leukemijaretai pranešama apie keletą padermių pelių, nors cheminės medžiagos ir jonizuojanti spinduliuotė gali padidinti kai kurių pelių padermių paplitimą1, 2. NOD/Shi-scid IL-2R null (NOG) pelės yra labai sunkios.imunodeficito gyvūnai, ir yra T-, B- ir natūralių žudikų ląstelių defektų bei blogai veikiančių makrofagų ir dendritinių ląstelių dėl IL-2 receptorių grandinės (IL2R c) išjungimo į NOD-scid padermę3. Ši pelių padermė naudojama neklinikiniams tyrimams, pvz., navikogeniškumo tyrimui, siekiant įvertinti biologinių produktų, skirtų regeneracinei medicinai, naudojant žmogaus gautą ląstelę / audinį, kokybę ir saugą, nes žymiai geriau įsitvirtina ksenogeninės ląstelės4–6. Nors imunodeficito būklė ir jos reikšmė ksenografams buvo gerai ištirta, yra mažai informacijos apie spontaniškus navikus, atsirandančius šioje pelių padermėje, pvz., užkrūčio liaukos limfomą,pieno liaukosliauka adenoma/adenokarcinoma, bronchioloalveolinė karcinoma, rabdomiosarkomair teratoma7. Čia pranešame apie granulocitinės leukemijos atvejį 51-savaičių senumo NOG pelės patinams.

Gyvūnas buvo gautas iš In-Vivo Science Inc. (Kanagawa, Japonija) 6 savaičių amžiaus ir buvo laikomas negydomas. Gyvūnas buvo atskirai laikomas plastikiniame narve su individualiai vėdinama narvų sistema (Maxi Miser Caging System; Oriental Giken Inc., Tokijas, Japonija) aplinkai kontroliuojamos barjerinės sistemos patalpoje, kurioje buvo palaikoma 22 ± 2 laipsnių temperatūra. 50 ± 20 % drėgnumas ir 12-h šviesos/tamsos ciklas. Pelė buvo šeriama autoklavuotu granuliuotu ėdalu (CRF-1; Charles River Japan, Inc., Tokijas, Japonija) su autoklavuotu vandentiekio vandeniu ir libitum. Gyvūnas buvo tvarkomas pagal protokolą, patvirtintą CMIC Pharma Science Co., Ltd. institucinio gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto, kuris yra akredituotas AAALAC International.

Šiai pelei 49–51 savaitės amžiuje pasireiškė klinikiniai susilpnėjimo požymiai, tokie kaip anemija, šiurkštūs kvėpavimo judesiai ir kūno svorio sumažėjimas. Gyvūnas buvo nužudytas 51 savaitės amžiaus. Skrodimo metu blužnis pakitusi spalva ir padidėjo. Kituose organuose nepastebėta jokių akivaizdžių nenormalių bendrųjų radinių. Užkrūčio liauka ir limfmazgiai buvo atrofiniai, panašūs į normalių NOG pelių.

Visi organų ir audinių mėginiai buvo reguliariai renkami, fiksuojami 10% neutraliame buferiniame formaline, įterpti į parafiną ir suskirstyti maždaug 3 μm. Jo patologiniam tyrimui pjūviai buvo nudažyti hematoksilinu ir eozinu (HE). Blužnies ir kepenų sekcijos buvo imunohistochemiškai nudažytos triušio anti-žmogaus mieloperoksidazės (MPO) polikloniniam antikūnui (Dako Japonija, Tokijas, Japonija) kaip mieloidinių ląstelių žymekliui, triušio anti-žmogaus CD3 monokloniniam antikūnui (Nichirei Biosciences Inc., Tokijas, Japonija) ) kaip T ląstelių žymeklis ir triušio anti-žmogaus Pax{6}} monokloninis antikūnas (Abcam Inc., Kembridžas, JK) kaip B ląstelių žymeklis8. Sekcijos buvo inkubuojamos su antikūnais kambario temperatūroje 1 valandą, o imunodetekcija buvo atlikta naudojant Histofine® MOUSESTAIN KIT (Nichirei Biosciences Inc.) su 3,3′-diaminobenzidinu/H2O2 kaip chromogenu. Imunitetai buvo tadapriešdažytas hematoksilinu.

Histopatologiškai krūtinkaulio ir šlaunikaulio kaulų čiulpai buvo labai ląsteliniai ir beveik išimtinai užpildyti neoplastinėmis ląstelėmis (1A pav.). Riebalinis audinys buvo visiškai pasislinkęs. Smegenų čiulpuose kartais buvo ląstelių židinių, susidedančių iš eritroidinių ir megakariocitinių elementų, kurie buvo laikominormali hematopoezė. Dauguma neoplastinių ląstelių pasižymėjo blastine išvaizda, kuriai būdingi dideli, ovalūs arba šiek tiek netaisyklingos formos branduoliai ir tinklinis chromatinas, turintis vieną ar daugiau iškilių branduolių. Buvo nedaug ląstelių su inksto arba žiedo formos branduoliais, taip pat buvo keletas ląstelių su skilteliniais branduoliais (1B pav.). Granulės neoplastinių ląstelių citoplazmoje nebuvo akivaizdžios pjūviuose, dažytuose HE. Kaulų čiulpuose buvo rasta daugybė mitozinių figūrų, taip pat kartais buvo pastebėti apoptoziniai kūnai. Neoplastinės ląstelės ryškiai įsiveržė į perioste ir aplinkinius skeleto raumenis. Neoplastinės ląstelės buvo plačiai įsiskverbusios į kitus organus ir audinius, o blužnis ir kepenys buvo aiškiai įtrauktos. Blužnyje neoplastinės ląstelės buvo stebimos visoje raudonojoje pulpoje (2 pav.). Neoplastinių ląstelių kapsulinė infiltracija buvo akivaizdi. Buvo pastebėtos kelios besivystančios eritroidų serijos ir megakariocitai. Retkarčiais buvo stebimi megakariocitai, kurių citoplazmoje yra viena ar keletas mieloidinių ląstelių, o tai rodo emperipolezę. Kepenyse neoplastinės ląstelės difuziškai įsiskverbė į Glissono kapsulę ir kepenų sinusoidus (3 pav.). Kai kuriose kraujagyslėse taip pat buvo neoplastinių ląstelių su inksto arba žiedo formos branduoliais. Kai kurie hepatocitai periportalinėje srityje su ryškia neoplastinių ląstelių infiltracija parodė degeneraciją arba nekrozę, o normali kepenų skilties struktūra liko nepažeista. Neoplastinių ląstelių infiltracija taip pat buvo nustatyta kituose organuose, įskaitant plaučių alveolių sienelę ir perivaskulinį regioną, tarp inksto stadiono, antinksčių sinusoidą ir skrandžio trakto (skrandžio ir žarnyno) gleivinę bei pogleivinę. Imunohistochemiškai didelė neoplastinių ląstelių populiacija raudonojoje blužnies pulpoje (4 pav.) ir kepenų sinusoidėje buvo teigiama MPO. CD3 ir Pax-5 teigiamų ląstelių neaptikta. CD3 ir Pax-5 imuninio dažymo rezultatai buvo panašūs į normalių NOG pelių blužnies, kurios buvo histologiškai hipoplastinės ir nerodė CD3 ar Pax{13}} teigiamų ląstelių, rezultatus.

Imunohistocheminis tyrimas atskleidė, kad neoplastinės ląstelės atsirado iš mieloidinių ląstelių linijų. Kai kuriose susijusiose srityse, ypač blužnyje ir kepenyse, nedidelis skaičius ląstelių turėjo inkstų, žiedo ar skilties formas, rodančias diferencijuotas mieloidines serijas. Šie radiniai rodo, kad neoplastinės ląstelės yra gautos iš nesubrendusių granulocitų. Sunkios mielopoezės atvejis gali būti akivaizdus, ​​kai yra visų rūšių besivystančios mieloidinės serijos, priešingai nei nesubrendusių ląstelių dominavimas leukemijoje. Be to, progresuojanti anemija yra dažnas klinikinis granulocitinės leukemijos požymis, o eritroidinių ir megakariocitinių ląstelių padidėjimas yra menkas1. Nedidelė granulocitų populiacija su skilteliniais branduoliais paveiktoje zonoje be akivaizdaus uždegimo rodo, kad šiuo atveju yra neoplastinė, o ne reaktyvi mielopoezė.

Granulocitinės leukemijos atveju kaulų čiulpai gali būti pakeisti nesubrendusiomis ir subrendusiomis mieloidinėmis ląstelėmis. Ankstesnėje ataskaitoje apie kitas pelių padermes šios neoplastinės ląstelės visiškai įsiskverbė į kepenis, blužnį, limfmazgius ir kt.2, o šios blužnies ir kepenų ląstelės daugiausia buvo raudonojoje pulpoje ir aplink Glissono kapsulę1. Taigi leukeminių ląstelių pasiskirstymas šiuo atveju buvo identiškas ankstesniam atvejui. Remiantis ląstelių morfologija, pelių granulocitinė leukemija skirstoma į du tipus: jaunatvinę, kuri yra panaši į žmogaus ūminę mielogeninę leukemiją, ir subrendusią į žmogaus lėtinę mielogeninę leukemiją1. Nepilnamečių atveju kaulų čiulpų, blužnies ir kepenų neoplastinėse ląstelėse vyravo menkai diferencijuotos ląstelės, tuo tarpu galima pastebėti įvairių brendimo laipsnių mieloidinius elementus, o kai kuriais brandžiais atvejais mieloblastų procentas buvo mažas2, 9. Šiuo atveju leukemijos ląstelėse dominavo nesubrendusi forma su dideliais, ovaliais arba šiek tiek netaisyklingos formos branduoliais. Be to, atsižvelgiant į klinikinius duomenis, kad bendras sveikatos pablogėjimas, įskaitant progresuojančią anemiją ir šiurkščius kvėpavimo judesius, išsivystė ūmiai; todėl nagrinėjama byla laikoma nepilnamečio tipo.

1 pav. Šlaunikaulio kaulų čiulpų histologiniai vaizdai. A: Neoplastinės ląstelės difuziškai dauginasi ir taip pakeičia kaulų čiulpus. B: Branduoliai yra dideli, ovalūs arba šiek tiek netaisyklingos formos. Nedidelis skaičius ląstelių turi inkstų (geltonos rodyklės galvutės), žiedo (žalios rodyklės antgalio) arba skilties (baltos rodyklės antgalio) formos branduolius. Mitozinė figūra pažymėta balta rodykle. JIS dėmių. Juoda juosta=50 μm (A), 10 μm (B).

Ankstesniame leidinyje apie NOG peles neoplastiniai pažeidimai paprastai buvo nedažni; tačiau užkrūčio liaukos limfoma buvo nustatyta 0,82 % amžiaus grupėje nuo 16 iki 40 savaičių7, 10. Mūsų žiniomis, NOG pelėms anksčiau nebuvo pranešta apie spontanišką granulocitinę leukemiją. Kai kuriose pelių padermėse, įskaitant B6C3F1 ir BALB/c, granulocitinė leukemija pasireiškė retai2, 11, ir apie tai nebuvo pranešta šioms 12 mėnesių ar jaunesnėms pelėms. Šiuo atveju granulocitinė leukemija išsivystė 51 savaičių amžiaus, o tai buvo palyginti jaunas amžius. Ši nauja informacija apie spontaniškus navikus gali būti naudinga tinkamai naudojant šią pelės padermę tolesniuose tyrimuose.