Kalcitriolio senėjimą stabdančio poveikio žmogaus natūralioms ląstelėms žudančioms in vitro tyrimas Ⅱ

3. Rezultatai

Šiame tyrime daugiausia dėmesio buvo skiriama kalcitriolio senėjimui stabdančiam poveikiui NK ląstelėms. Rezultatai parodė, kad Calcitriolsumažino su senėjimu susijusių biomarkerių, įskaitant CD16, ekspresiją, TIM3, PD-1, KIR irpadidino NK ląstelių NKG2A ekspresiją. Taip patslopina NK ląstelių dauginimąsiirsuimti juos G1 fazėje. Kalcitriolissumažino uždegiminių veiksnių išsiskyrimąpvz., IL-5, IL-13, IFN- ir TNF- ir turėjo tam tikrųantioksidacinis poveikis, kuris galėtų prisidėti prie joanti-senėjimo poveikis.

Spustelėkite čia, kad sužinotumėte „Cistanche“ antioksidacinį poveikį ir gautumėte pavyzdį

3.1 Kalcitriolis pakeitė paviršiaus senėjimo žymenų ekspresiją, sulėtino NK ląstelių amplifikaciją ir palaikė NK ląsteles G1 fazėje.

Senstančios NK ląstelės parodė didelę su senėjimu susijusių biomarkerių, tokių kaip CD16, PD-1, TIM3 ir KIR, ekspresiją ir mažą NKG2A ekspresiją. Mes nustatėme, kad su senėjimu susijusių biomarkerių NKG2A (1a pav.) (*P < 0.05) ekspresijos lygiai padidėjo, o CD16 (1b pav.), TIM3 (1c pav.) ), PD-1 (1d pav.) ir KIR (1e pav.) (*P < 0,05) sumažėjo po 72 valandų gydymo kalcitrioliu. Atvirkštinis poveikis buvo teigiamai koreliuojamas su kalcitriolio koncentracija (papildomas 1 paveikslas).

Mes išplėtėme ląsteles iš žmogaus periferinio kraujo mėginių in vitro. Tada išskyrėme NK ląsteles (CD{{0}}CD56 plius) rūšiuodami magnetinėmis granulėmis (1f pav.). Tada surūšiuotos NK ląstelės buvo kultivuojamos su skirtingomis kalcitriolio arba rapamicino koncentracijomis 72 valandas. CCK8 dažymo rezultatai parodė, kad kalcitrioliu apdorotų didelės koncentracijos NK ląstelių (10− [7] M) augimo greitis buvo lėtesnis nei neigiamos kontrolinės grupės (NC) (*P < {{17). }}.{25}}5) (1g pav.). Be to, kalcitriolis reguliavo NK ląstelių ciklą. Po gydymo kalcitrioliu 48 valandas, NK ląstelės parodė didelį nuo kalcitriolio koncentracijos priklausomą poslinkį link G1 fazės (* P < 0, 05), o ląstelių dalis G2 fazėje (# P < 0, 05) sumažėjo. Kalcitrioliu apdorotų NK ląstelių dalis S fazėje nepakito, nepaisant kalcitriolio koncentracijos (1h pav., 2 papildomas paveikslas). Tada išbandėme, ar šis iš kalcitriolio gautas G1 fazės sustabdymas sukėlė NK ląstelių apoptozę ir nustatėme, kad NK ląstelių apoptozinis biomarkeris, T ląstelių imunoglobulinas ir imunoreceptorių tirozino pagrindu veikiantis slopinamasis motyvas (ITIM) domenas (TIGIT) neparodė reikšmingų pokyčių (P > 0,05). , NS) (1i pav.). Šie rezultatai reiškė, kad kalcitriolio pridėjimas sumažino NK ląstelių augimo greitį, sumažino jų proliferaciją ir sukėlė NK ląstelių G1 fazės sustabdymą, o ne sukėlė apoptozę.

3.2 Kalcitriolis sumažino uždegiminių citokinų išsiskyrimą NK ląstelėse ir slopino NK ląstelių citotoksiškumą

Uždegimas yra lėtinis žemo laipsnio uždegimas. Tai pagreitina NK ląstelių senėjimą, nes NK ląstelės dalyvauja šiame lėtiniame uždegime. 2a paveiksle parodyta, kad IL-5, IL-13, IFN- ir TNF- lygiai reikšmingai sumažėjo visose grupėse nei neigiamos kontrolės (*P < 0.05). IFN ir TNF yra gerai žinomi priešuždegiminiai citokinai, tačiau kai kurie tyrimai taip pat parodė priešuždegimines IL -5 savybes. Buvo pranešta, kad IL-13 prisideda prie įvairių tipų gleivinės uždegimo, pvz., alerginės astmos, opinio kolito, eozinofilinio ezofagito ir kelių su fibroze susijusių ligų.

Tačiau NK ląstelių citotoksiškumas daugiausia susijęs su uždegiminių citokinų išsiskyrimu ir ląstelių degranuliacija. K562 ląsteles pažymėjome DIO ir kartu kultivavome DIO-K562 ląsteles su kalcitrioliu apdorotomis NK ląstelėmis 4 valandas. DIO ir PI plius ląstelių procentas buvo mažesnis visose efektoriaus (E) / tikslinės (T) santykio grupėse nei neigiamos kontrolės (*P < 0.{11}}5) (2b pav. c). Išvestinė 107 diferenciacijos klasterio išraiška (CD107) parodė mažesnę degranuliaciją (*P < 0,05) (2d pav.). Šie rezultatai rodo, kad kalcitriolis slopina NK žudymo funkciją.

3.3 Kalcitriolis suaktyvino SIRT1- ∆Exon8 ekspresiją ir su senėjimu susijusį SIRT1/pERK kelią

Norėdami ištirti kalcitriolio senėjimą stabdantį poveikį NK ląstelėms, imunoblotingu nustatėme su senėjimu susijusius signalizacijos kelius. Buvo atlikta Western blot analizė, siekiant įvertinti VDR, SIRT1-∆Exon8, SIRT1 ir PERK ekspresijos lygius kalcitrioliu apdorotose NK ląstelėse. Statistinė analizė parodė, kad esant didelėms koncentracijoms kalcio triolis aktyvavo VDR/SIRT1/pERK ašį. Tuo tarpu kalcitriolis suaktyvino SIRT1-∆Exon8 raišką (*P < 0.05). (3a pav.).

1 pav. Su senėjimu susijęs NK ląstelių fenotipas, ląstelių išsiplėtimas ir ląstelių ciklo analizė. (ae) Žmogaus NK ląstelės, apdorotos kalcitrioliu arba rapamicinu 72 valandas, parodė šiuos ląstelių biomarkerius: natūralaus žudiko grupės 2 narys A (NKG2A), 16 diferenciacijos klasteris (CD16), T ląstelių imunoglobulinas ir mucino domeno turintis baltymas 3 ( TIM3) užprogramuota ląstelių mirtis-1 (PD-1) ir į imunoglobuliną panašus receptorius (KIR), kurie buvo susiję su senėjimu. Kaip teigiama kontrolė buvo naudojama 50 nM rapamicino (RAPA). n=3 kiekvienai grupei. *P < 0.05 ir **P < 0.01 buvo lyginami su neigiamos kontrolės (NC) grupe. f ) NK ląstelės (dešinėje), išskirtos iš žmogaus periferinio kraujo mononuklearinių ląstelių (PBMC, kairėje), rūšiuojant magnetinius karoliukus. g) Ląstelių proliferacijos analizė, išmatuota 8 ląstelių skaičiavimo rinkiniu (CCK8). (h) Kalcitriolio arba rapamicino poveikis ląstelių ciklui surūšiuotose nk ląstelėse po gydymo 72 val., wp 0.0, 0.05 ir fp < 0,05 parodė reikšmingą G1, S ir G2 fazių skirtumai atitinkamai. Visos grupės buvo lyginamos atitinkamai su NC. n=3. ) T ląstelių imuninės globulino ir imunoreceptorių tirozino pagrindu veikiančių slopinamųjų motyvų (M) domeno (TGI) teigiamų NK ląstelių procentas po gydymo kalcitrioliu arba rapamicinu 72 valandas.*p < 0,05 ir **p < 0,01 buvo lyginamas su NC. n=3.

3.4 Kalcitriolis priešinosi oksidacinio streso sukeltam NK ląstelių senėjimui in vitro

Visuotinai pripažįstama, kad senėjimą sukelia oksidacinės žalos kaupimasis dėl daugybės įrodymų, rasta per metus [31]. 24 valandas auginome NK ląsteles su skirtingomis H2O2 koncentracijomis ir nustatėme, kad 1{{1{{20}}}0 μM buvo artimiausia vidutinei mirtinai dozei (LD50) (3b pav.) . TIM3 ekspresija NK ląstelių populiacijoje padidėjo pridėjus H2O2, o ekspresija sumažėjo po gydymo kalcitrioliu (* P < 0,05) (3c pav.). Be to, senstančios NK ląstelės buvo nudažytos mėlynai, esant -galaktozidazei. Ši mėlyna ląstelių spalva yra specifinis senstančių ląstelių požymis. Statistinė analizė parodė, kad neapdorotos NK ląstelės turi mažesnį ląstelių galaktozidazės aktyvumą, o NK ląstelės, veikiamos H2O2, parodė padidėjusį galaktozidazės aktyvumą. Kalcitriolis sumažino - galaktozidazės teigiamą populiaciją, o tai rodo, kad yra mažiau senstančių ląstelių (* P < 0,05) (3d pav.). Sumažėjęs mitochondrijų membranos potencialas taip pat buvo pastebėtas įvairiose senstančiose kelių žinduolių rūšių ląstelėse. Šiame tyrime įvertinome NK ląstelių mitochondrijų membranos potencialą. Statistiniai rezultatai parodė, kad H2O2 reikšmingai sumažino NK ląstelių aktyvumą lyginant su neapdorotų ląstelių aktyvumu, o kalcitriolis padidino H2O2 daromą žalą (*P < 0,05) (3e pav.).

2 pav. Kalcitriolio poveikis NK ląstelių funkcijoms. a ) Citokino, kurį išskiria kalcitrioliu apdorotos NK ląstelės, analizė per 48 valandas. b) Fluorescenciniu būdu aktyvuotų ląstelių rūšiavimo (FACS) rezultatai parodė, kad negyvos K562 ląstelės, pažymėtos 3,3 -oktadeciloksakarbocianinuDlO) ir propidžio jodidu (P).K562 ląstelės buvo kultivuojamos kartu su skirtingais kalcitrioliu apdorotų Nk ląstelių santykiais. 4 val. (C) Negyvų K562 ląstelių FACS analizė žudymo tyrimuose. d) apdorotų Nk ląstelių degranuliacijos poveikis žudymo tyrimuose. n=3 eaciyroup. *p < 0.{16}}5 ir **p < 0,01 buvo lyginami su NC

3.5 Kalcitriolis priešinosi NK ląstelių apoptozei, sukeltai oksidacinio streso in vitro

Tada mes išmatavome apoptotinių ląstelių skaičių. Srauto citometrijos rezultatai parodė, kad gydymas 100 μM H2O2 24 valandas sukėlė reikšmingą NK ląstelių apoptozę. Tačiau gydymas kalcitrioliu sumažino apoptozinį santykį (* P < 0,05) (4a pav.). Visi aukščiau pateikti rezultatai parodė kalcitriolio atsparumą oksidaciniam stresui, kurį sukelia H2O2. Tačiau oksidacinio streso metu aptikome apoptozinius baltymus NK ląstelėse. Prieš pradedant gydymą H2O2, į NK ląsteles 24 valandas buvo pridėta 10– [7] M kalcitriolio. Su apoptoze susijusių baltymų, kaspazės-3 p17 ir kaspazės-3 p20, kiekis žymiai padidėjo po gydymo H2O2. Kalcitriolis sumažino H2O2-išvestą apoptozę ir sumažino kaspazės -3, p17 ir kaspazės-3 p20 ekspresiją (*P < 0,05) (4b pav.). Šie rezultatai parodė, kad kalcitriolis priešinosi H2O2 sukeltai apoptozei.

3 pavanti-senėjimo poveikiskalcitriolio ant NK ląstelių. (a) Vitamino D receptoriaus (VDR), sirtuino 1 (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8 ir į proteinkinazę R panašios endoplazminės tinklelio kinazės (pERK) ekspresija NK ląstelėse buvo aptikta Western blot analize. po gydymo kalcitrioliu 48 val. Gliceraldehido -3-fosfato dehidrogenazė (GAPDH) buvo naudojama kaip įkrovos kontrolė. Juostinė diagrama, iliustruojanti Western blotting rezultatus (n=3). *P < 0.{{10}}5 ir **P < 0.01 buvo lyginami su NC (n=3). b) NK ląstelių mirštamumo dozės kreivė po apdorojimo vandenilio peroksidu (H2O2) 24 valandas. c ) TIM3 ląstelių, turinčių didelę ekspresiją, procentas po apdorojimo 100 μM H2O2 24 valandas. d) su senėjimu susijęs -galaktozidazės dažymas ir analizės rezultatai. Senstančios ląstelės buvo nudažytos mėlyna spalva ir pažymėtos raudonomis rodyklėmis. Mastelio juosta, 50 μm. (e) NK ląstelės buvo nudažytos Hoechst ir chlorometil-X-Rosaminu (CMXRos), kad būtų nustatyta ląstelių vieta ir mitochondrijų membranos potencialas. Senstančios ir apoptotinės ląstelės buvo Hoechst plus CMXRos− ir pažymėtos baltomis rodyklėmis. Mastelio juosta, 50 μm. Statistinė analizė parodė santykinį fluorescencijos intensyvumą. *P < 0,05 ir **P < 0,01 buvo lyginami su H2O2 grupe C, D ir E paveiksluose (n=3).

4 pav. Kalcitriolio antiapoptozinis poveikis NK ląstelėms. (a) Anti-apoptotinis kalcitriolio poveikis H2O2- sukeltam pažeidimui. FACS analizė parodė apoptozinių NK ląstelių procentą po gydymo 100 μM H2O2 24 valandas. (b) Kaspazės -3 p20 ir kaspazės-3 p17 ekspresijos lygiai NK ląstelėse buvo aptikti Western blot analize po 24 valandų apdorojimo 100 μM H2O2. GAPDH buvo naudojamas kaip pakrovimo kontrolė. Juostinė diagrama, iliustruojanti Western blotting rezultatus (n=3). *P < 0,05 buvo lyginamas su H2O2 grupe.

4. Diskusija

Ilgalaikė uždegimo ir oksidacinio streso sąveika yra svarbus senėjimo veiksnys. Be to, uždegimas ir oksidacinis stresas yra sinergetiški [32]. Oksidacinio streso susidaręs ROS perteklius atakuoja kūno ląsteles. Šio proceso metu aktyvuota imuninė sistema išskiria uždegiminius veiksnius, kad sunaikintų nenormalias ląsteles, o tai lemia tolesnę ROS susidarymą. Kalcitriolio trūkumas gali sukelti autoimunines ligas, lėtines medžiagų apykaitos ligas ir navikus. Tačiau mažai žinoma apie kalcitriolio senėjimą stabdantį poveikį imuninei sistemai, ypač NK ląstelėms.

Šiame tyrime ištyrėme kalcitriolio senėjimą stabdantį poveikį NK ląstelėms. Mes nustatėme, kad kalcitriolis padidino NKG2A ekspresiją, tuo pačiu sumažindamas KIR ekspresiją in vitro. CD56−CD16 plius NK ląstelių subpopuliacija, kuri, kaip žinoma, yra susijusi su lėtiniu uždegimu, žymiai padidėja vyresnio amžiaus žmonėms [33]. Todėl kalcitriolio sukeltas CD16 ekspresijos sumažėjimas gali būti siejamas su jo priešuždegiminiu poveikiu. Buvo pranešta, kad TIM-3 ir PD-1 yra NK ląstelių slopinimo ir išeikvojimo receptoriai. Mūsų tyrimas parodė, kad kalcitriolis sumažino TIM-3 ir PD-1 ekspresijos lygius ir užkirto kelią NK ląstelių apoptozei.

Be to, kalcitriolis slopino NK ląstelių išsiplėtimą ir palaikė NK ląstelių populiaciją G1 fazėje in vitro. Tačiau S fazės ląstelės nebuvo paveiktos. TIGIT, žinomas kaip NK ląstelių kontrolinio taško faktorius, išliko nepakitęs. Šie rezultatai parodė, kad 4 pav. Anti-apoptotinis kalcitriolio poveikis NK ląstelėms. (a) Anti-apoptotinis kalcitriolio poveikis H2O2-sukeltam pažeidimui. FACS analizė parodė apoptozinių NK ląstelių procentą po gydymo 100 μM H2O2 24 valandas. (b) Kaspazės-3 p20 ir kaspazės-3 p17 ekspresijos lygiai NK ląstelėse buvo aptikti Western blot analize po 24 valandų apdorojimo 100 μM H2O2. GAPDH buvo naudojamas kaip pakrovimo kontrolė. Juostinė diagrama, iliustruojanti Western blotting rezultatus (n=3). *P < 0,05 buvo lyginamas su H2O2 grupe. BIOENGINEERED 6851 kalcitriolis nesukėlė NK ląstelių mirties, bet tik sulėtino NK ląstelių plėtimosi greitį.

Gerai žinoma, kad uždegimas sukelia imuninės sistemos senėjimą [34, 35]. Be to, mes nustatėme, kad kalcitriolis sumažino IL-5, IL-13, IFN- ir TNF- kiekį NK ląstelėse. NK ląstelių citotoksiškumą iš dalies lemia uždegiminių veiksnių išsiskyrimas [36]. Be to, sumažėjo K562 naviko ląstelių mirtingumas ir NK ląstelių degranuliacija. Šie rezultatai atitiko mūsų lūkesčius. Rapamicinas yra gerai žinomas vaistas, mažinantis medžiagų apykaitos greitį, kad būtų išvengta senėjimo[37], kuris šiame tyrime naudojamas kaip teigiama kontrolė. Tai sukelia imunosupresiją ir padidina galimą naviko ir naviko naštos riziką. Ši našta buvo patvirtinta krūties vėžio pelių modeliuose [38]. Ar kalcitriolis turi panašų poveikį kaip rapamicinas, nežinoma. Reikėtų atlikti daugiau tyrimų su gyvūnais ir klinikinių tyrimų, siekiant patikrinti jų poveikį žmogaus organizmui.

Galiausiai ištyrėme kalcitriolio poveikį antioksidantų senėjimui. Resveratrolis, gerai žinomas vaistas nuo senėjimo, gali sumažinti NF-κB kelią, aktyvuodamas SIRT1 / PERK ašį. Taip pat buvo įrodyta, kad šis sumažintas reguliavimas yra naudingas neurodegeneraciniams sutrikimams ir širdies ir kraujagyslių ligoms [39]. SIRT1 deacetilinimas yra susijęs su medžiagų apykaitos kontrole ir mitochondrijų biogeneze. Esant tokio tipo reguliavimui, padidėjęs SIRT1 lygis gali paskatinti peroksisomų proliferatoriaus aktyvuoto receptorių gama koaktyvatoriaus -1 alfa (PGC-1) kaupimąsi branduolyje, o tai lemia genų, būtinų mitochondrijų funkcija [40]. Be to, SIRT1 slopina žinduolių taikinį rapamicino (mTOR) signalizacijos keliu, kuris gali apsaugoti nervus ir priešintis pelių smegenų senėjimui [41]. Šiame tyrime nustatėme panašų kalcitriolio reguliavimo būdą. Kalcitriolis aktyvavo SIRT1 per VDR ir pakėlė SIRT1 / pERK ašį.

Be to, mes nustatėme, kad kalcitriolis padidino SIRT1-∆Exon8 ekspresiją. Įtempiai yra žinomi kaip SIRT1-∆Exon8 reguliacinis veiksnys. Nors pats SIRT1-∆Exon8 rodo sumažintą p53 deacetilinimo aktyvumą, jis daro papildomą deacetilinimo poveikį p53, kai yra išreikštas kartu su viso ilgio SIRT1 [42]. Šis poveikis parodė anti-apoptotinę kalcitriolio funkciją NK ląstelėse. Tačiau dar reikia geriau suprasti SIRT1-∆Exon8 vaidmenį su amžiumi susijusiuose keliuose. Kadangi SIRT1 sumažėjimas gali būti dėl oksidacinio pažeidimo [43], mes sukūrėme ūmaus senėjimo NK ląstelių modelį in vitro naudodami H2O2. H2O2 sukeltas oksidacinis senėjimas padidino TIM3 ekspresiją ir -galaktozidazės aktyvumą NK ląstelėse. Mes nustatėme, kad kalcitriolis priešinosi oksidaciniam pažeidimui ir išlaikė NK ląstelių mitochondrijų aktyvumą ir ląstelių gyvybingumą, tuo pačiu užkertant kelią ląstelių apoptozei. Tačiau kalcitriolis klinikinėje medicinoje dar nebuvo nustatytas kaip senėjimą stabdantis vaistas, nes reikia daugiau įrodymų apie šio vaisto senėjimą stabdantį poveikį in vivo. Apibendrinant, mes pateikėme preliminarius įrodymus, kad kalcitriolio senėjimą stabdantis poveikis NK ląstelėms in vitro . Manome, kad šio vaisto poveikis turėtų būti toliau tiriamas atliekant būsimus tyrimus su gyvūnais ir klinikinius tyrimus.

5. Išvada

Šiame tyrime mes parodėmeanti-senėjimo poveikiskalcitriolio ant NK ląstelių. Kalcitriolis pakeitė išraiškąsenėjimo biomarkeriaiant NK ląstelių. Tai sulėtino NK stiprinimą ir išlaikė juos G1 fazėje. Be to, kalcitriolis slopino uždegiminių citokinų išsiskyrimą ir sumažino NK ląstelių degranuliaciją. SIRT1-∆Exon8 ir VDR/SIRT1/pERK ašies aktyvinimas kalcitrioliu gali būti pagrindinis kalcitriolio senėjimą stabdančio poveikio mechanizmas, remiantis tuo, kas išdėstyta pirmiau. Galiausiai kalcitriolis in vitro priešinosi oksidaciniam NK ląstelių senėjimui. Tolesni tyrimai turėtų būti sutelkti į gyvūnų ir klinikinius tyrimus.

Pabrėžia

(1) Kalcitriolis sumažino su amžiumi susijusių biomarkerių, įskaitant CD16, TIM3, PD-1, KIR, ekspresiją ir padidino NK ląstelių NKG2A ekspresiją. (2) Kalcitriolis sugebėjo slopinti NK ląstelių dauginimąsi ir sustabdyti jas G1 fazėje. (3) Kalcitriolis sumažino pagrindinių uždegiminių veiksnių, tokių kaip IL-5, IL-13, IFN- ir TNF- iš NK ląstelių, išsiskyrimą.(4) Kalcitriolio senėjimą stabdantis poveikis NK ląstelėms gali pasiekti Sirt1- pERK signalo keliu.

Padėka Norėtume padėkoti visiems mūsų grupės darbuotojams už paramą ir Šendženo mokslo ir technologijų inovacijų komitetui už finansinę paramą šiam tyrimui.

Finansavimas Šį darbą finansiškai parėmė Šendženo mokslo ir technologijų inovacijų komitetas (JCYJ20170412155231633), Šendženo pagrindinių medicinos disciplinų statybos fondas (Nr. SZXK062), Čengdu Wecistanche Biotech ir Sanmingo medicinos projektas Šendžene (Nr. SZSM202011010); Šendženo mokslo ir technologijų inovacijų komitetas [JCYJ20170412155231633]; Shenzhen Key Medicinos disciplinos statybos fondas [Nr. SZXK062]; Sanmingo medicinos projektas Šendžene [Nr. SZSM202011010].

Etikos patvirtinimas Visas procedūras patvirtino Shenzhen Luohu liaudies ligoninės etikos komitetas (ZLNK 12/2019, Šendženas, Kinija). Buvo gautas informuotas sutikimas eksperimentuoti su žmonių mėginiais.

Atskleidimo pareiškimas Visi autoriai pritarė šio rankraščio pateikimui. Autoriai pareiškia, kad jie neturi žinomų konkuruojančių finansinių interesų ar asmeninių santykių, kurie galėjo turėti įtakos šiame darbe aprašytam darbui.

Nuorodos

[1] Ovadya Y, Landsberger T, Leins H ir kt. Sutrikusi imuninė priežiūra pagreitina senstančių ląstelių kaupimąsi ir senėjimą. Nat Commun. 2018;9 (1): 5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L ir kt. Senėjimo požymiai. Ląstelė. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM ir kt. Killers 2.0: NK ląstelių terapija yra vėžio kontrolės priešakyje. J Clin Invest. 2019;129(9):3499–3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R ir kt. Pluripotentinės kamieninių ląstelių NK ląstelės, turinčios didelio afiniteto neskaldomą CD16a, tarpininkauja pagerintam priešnavikiniam aktyvumui. Kraujas. 2020;135(6):399–410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Natūralios žudikų ląstelės: sveikata ir ligos. Hematol Oncol Stem Cell Ther. 2015;8(2):47–55.

[6] Le Garff-Tavernier M ir kt. Žmogaus NK ląstelės rodo didelius fenotipinius ir funkcinius pokyčius per visą gyvenimą. Senėjimo ląstelė. 2010;9(4):527–535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J ir kt. NKG2A, KIR ir CD57 ekspresijos modeliai apibrėžia CD56dim NK ląstelių diferenciacijos procesą, atsietą nuo NK ląstelių ugdymo. Kraujas. 2010; 116 (19): 3853–3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. Su amžiumi susiję natūralių žudikų ląstelių repertuaro pokyčiai: poveikis NK ląstelių funkcijai ir imuninei priežiūrai. Vėžys Imunol Imunother. 2016;65(4):417–426. [9] Bi J, Tian Z. NK ląstelių išsekimas. Priekinis imunolis. 2017;8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E ir kt. Lėtinis uždegimas ligos etiologijoje per visą gyvenimą. Nat Med. 2019;25(12):1822–1832.

[11] Liu Y ir kt. Citomegaloviruso peptidui specifinis antikūnas keičia natūralią žudikų ląstelių homeostazę ir yra būdingas kelioms autoimuninėms ligoms. Ląstelės šeimininko mikrobas. 2016;19(3):400–408.

[12] Campus X, Pera A, Solana R ir kt. NK ląstelės sveiko senėjimo ir su amžiumi susijusių ligų atvejais. J Biomed Biotechnol. 2012; 2012: 195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP ir kt. Senėjimo poveikis nk ląstelių populiacijai ir jų proliferacijai ex vivo kultūros sąlygomis. Analinių ląstelių patolis (Amst). 2018; 2018: 7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A ir kt. Farmakologinis vitamino D ir jo analogų poveikis: naujausi pokyčiai. Narkotikų diskas šiandien. 2014;19 (11):1769–1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J ir kt. Konstitucinio DNR pažeidimo signalizavimo susilpnėjimas

Paprašyk daugiau:

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plius 86 15292862950